为了使目前有限的疫苗使用得当，发挥乙肝疫苗的预防作用，应选择最容易感染乙肝病毒的人群预防注射：
1、经常接触乙肝表面抗原阳性病人血清和为其常做手术的医务人员。2、经常献血的人。3、乙肝表面抗原阳性患者的家属。4、母亲乙肝表面抗原阳性者，新生儿在出生后24小时内应注射乙肝疫苗。5、婚前检查一方乙肝表面抗原阳性时，可给对方注射乙肝疫苗。6、幼儿园的保育员、食品厂加工工人、炊事员均应进行预防注射，以保证易感人群的身体健康。
一般来说，凡没有感染过乙肝病毒者都应该注射乙肝疫苗。重点应用人群有两部分，一部分是新生儿、学龄前儿童，尤其是母亲在妊娠期间为病毒携带者的新生儿。另一部分是危险人群，包括接触乙肝病人的医护人员，直接接触血液、分泌物的医护人员，乙肝病人和乙肝病毒携带者的配偶、家庭成员或密切接触者。
注射乙肝疫苗后所产生的足量抗体只能预防乙肝病毒感染和乙肝发病，对其他类型的病毒性肝炎没有预防作用。接种者还可能感染甲、丙、戊、庚肝等病毒。
注射乙肝疫苗前一定要检查乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、表面抗体（抗-HBs）和核心抗体（抗-HBc），化验结果阴性者才可以注射。
老年人不必注射乙肝疫苗（一般指60岁以上），因为我国老年人大多已经感染过乙肝病毒。
有人对一组60岁以上老人进行调查，发现他们血液中的乙肝病毒感染标志达60%～80%，有的是HBsAg（表抗）携带者，有的是抗HBs阳性，后者说明已感染了乙肝病毒并获得了免疫力。
已知对疫苗任何成分过敏者（如酵母等）及以往对乙肝疫苗过敏者不能接种。急性严重发热疾病患者应推迟接种。安在时慎用于孕期、哺乳期妇女，医生一般不推荐孕妇和在接种程序期内准备怀孕的妇女接种。